期刊简介
1980年创刊，中华医学会、徐州医学院主办。本刊前身是《国外医学?麻醉学与复苏分册》，以提高为宗旨，竭诚为我国麻醉学科学术水平的提高和人才建设起到推动和导向作用。期刊内容涵盖临床麻醉、重症监测治疗、生命复苏、疼痛诊疗、药物依赖与戒断等领域。本刊以综述为特色，以创新性研究成果为核心，以临床前瞻性研究、应用基础和基础研究为重点。设置有论著、综述、述评、病例析评、学科建设等栏目。目前已被列为中国科技论文统计源期刊及中国学术期刊综合评价数据库来源期刊，已被《中国学术期刊》光盘版、《中国期刊全文数据库》、万方数据库、美国化学文摘全文收录。
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首页>国际麻醉学与复苏杂志
- 杂志名称：国际麻醉学与复苏杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会,徐州医学院
- 国际刊号：1673-4378
- 国内刊号：32-1761/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
筛选有效抑制血管内皮细胞小窝蛋白-1表达的小干扰RNA及其毒性检测
刘华跃；嵇富海；王秀云；左剑玲；许期年
关键词：血管内皮细胞, 小窝蛋白-1, 小干扰RNA, 磺基罗丹明B法, 细胞毒性, 筛选
摘要：目的 筛选有效抑制血管内皮细胞小窝蛋白-1(Caveolin-1)表达的小干扰RNA(small interferenceRNA,siRNA)序列,并检测转染复合物的细胞毒性. 方法 设计合成针对Caveolin-1的siRNA 3条(siRNA422,siRNA548,siRNA710)及1条带绿色荧光标记的通用阴性对照FAM-siRNA.在siRNAFect介导下转染血管内皮细胞.用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定转染后血管内皮细胞中Caveolin-1 mRNA的表达,Western blot方法测定干扰后Caveolin-1蛋白表达,比较抑制率,筛选出有效抑制Caveolin-1表达的siRNA.采用磺基罗丹明B法(sulforhodamineB,SRB)分析转染复合物的细胞毒性. 结果 ①在siRNAFect相同剂量下,siRNA 20、30 nmol/L组或40 nmol/L组转染效率均达到85％以上(P＜0.01)；②siRNAFect 1.3μl复合10 nmol/L或20 nmol/L siRNA组细胞存活率均达到80％以上(P＜0.05)；③siRNA548对EA.hy926细胞Caveolin-1基因mRNA抑制效果明显(P＜0.01)；④与阴性对照组及siRNA422、siRNA710相比较,siRNA548干扰血管内皮细胞48 h后,Caveolin-1蛋白的表达量低(P＜0.01). 结论 ①siRNA548对血管内皮细胞Caveolin-1表达的抑制效果大.②siRNA浓度20 nmol/L复合siRNAFect 1.3μl转染效率高,细胞毒性低,适合转染.
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