期刊简介

               1980年创刊,中华医学会、徐州医学院主办。本刊前身是《国外医学?麻醉学与复苏分册》,以提高为宗旨,竭诚为我国麻醉学科学术水平的提高和人才建设起到推动和导向作用。期刊内容涵盖临床麻醉、重症监测治疗、生命复苏、疼痛诊疗、药物依赖与戒断等领域。本刊以综述为特色,以创新性研究成果为核心,以临床前瞻性研究、应用基础和基础研究为重点。设置有论著、综述、述评、病例析评、学科建设等栏目。目前已被列为中国科技论文统计源期刊及中国学术期刊综合评价数据库来源期刊,已被《中国学术期刊》光盘版、《中国期刊全文数据库》、万方数据库、美国化学文摘全文收录。                

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  • 杂志名称:国际麻醉学与复苏杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会,徐州医学院
  • 国际刊号:1673-4378
  • 国内刊号:32-1761/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
国际麻醉学与复苏杂志2016年第07期

尼古丁对BV-2小胶质细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体、小胶质细胞P2X4受体表达和脑源性神经营养因子释放的影响

王庆贺;张栋;武姗姗;于爱兰;朱文超;张霄迪;张宗旺

关键词:尼古丁, 痛觉过敏, 小胶质细胞, P2X4受体, α7烟碱型乙酰胆碱受体
摘要:目的 观察尼古丁对BV-2小胶质α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotine acetylcholine receptor,α7nAChR)、小胶质细胞P2X4受体(P2X4 receptor,P2X4R)表达和脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)释放的影响,以探讨小胶质细胞参与尼古丁所致痛觉过敏的可能分子机制. 方法 ①BV-2小胶质细胞接种在含12 mm圆形盖玻片无菌12孔板,待细胞处于对数生长期,完全随机分为2组:α7nAChR组和P2X4R组.免疫荧光标记检测α7nAChR和P2X4R在BV-2小胶质细胞上的表达.②当12孔板中BV-2细胞处于对数生长期,完全随机分为4组:尼古丁实验组(N组),尼古丁终浓度为100 μm/L;无血清培养基培养的空白对照组(C组);尼古丁拮抗剂组(NM组),10 nmol/L甲基牛扁碱(methyllycaconitine,MLA)预孵育30 min,改用含尼古丁的无血清培养基培养;单纯拮抗剂组(M组),10 nmol/L MLA预孵育30 main,改用无血清培养基培养.培养72 h后收集各组细胞.应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测α7nAChR mRNA和P2X4R mRNA表达量的变化,Western blot检测α7nAChR和P2X4R蛋白表达量的变化.③当12孔板中细胞处于对数生长期,完全随机分为4组:正常对照组(Control组)、尼古丁预处理+DMEM组(Nicotine+DMEM组)、尼古丁预处理+激动剂组(Nicotine+ATP组),尼古丁预处理+拮抗剂组(Nicotine+5-BDBD组).其中激动剂和拮抗剂由DMEM无血清培养基稀释,在尼古丁处理72 h后加入,各组总体积保持一致,24 h后ELISA检测培养液中BDNF释放量. 结果 ①免疫荧光标记结果显示BV-2细胞存在α7nAChR和P2X4R的阳性表达.②RT-qPCR结果显示尼古丁可上调BV-2细胞α7nAChR mRNA和P2X4RmRNA的表达,α7nAChR特异性拮抗剂MLA可抑制α7nAChR mRNA和P2X4R mRNA表达的上调;Western blot结果显示尼古丁处理可使BV-2细胞α7nAChR和P2X4R蛋白的表达上调,α7nAChR特异性拮抗剂MLA可抑制α7nAChR和P2X4R蛋白表达的上调.③ELISA检测培养液中BDNF含量结果显示:Nicotine+ATP组较Nicotine+DMEM组和Control组显著增多(P<0.05),Nicotine+DMEM组较Control组增多(P<0.05);Nicotine+5-BDBD组较Nicotine+DMEM组和Control组显著减少(P<0.05).结论 尼古丁可能通过α7nAChR上调小胶质细胞上P2X4R的表达进而通过BDNF的释放引起痛觉过敏的产生.